技術(shù)原理：

利用酵母菌株為受體，在脅迫條件下，檢測(cè)可以提高酵母菌株對(duì)逆境脅迫耐受能力的異源表達(dá)可溶性蛋白。通過(guò)抗性梯度實(shí)驗(yàn)對(duì)轉(zhuǎn)錄組范圍內(nèi)的抗性相關(guān)基因進(jìn)行篩選，并對(duì)篩選的結(jié)果進(jìn)行測(cè)序、生物信息學(xué)分析、歸納和分類的技術(shù)。

實(shí)驗(yàn)流程：

   1.對(duì)樣品脅迫處理并取樣；

   2.提取RNA并反轉(zhuǎn)構(gòu)建酵母文庫(kù)；

   3.轉(zhuǎn)化酵母菌株；

   4.確定酵母菌株致死條件并篩選；

   5.鑒定陽(yáng)性克隆并分析；

   6.基因功能驗(yàn)證。

專業(yè)技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

酵母菌為真核生物，具有與動(dòng)植物類似的蛋白質(zhì)折疊翻譯后加工、蛋白質(zhì)修飾等過(guò)程。從而使酵母菌株表達(dá)的植物、動(dòng)物蛋白具有正常的功能，這可以極大的降低假陽(yáng)性的概率。酵母高通量抗逆基因篩選可以快速篩選出非模式物種中大量與逆境脅迫相關(guān)的基因，這對(duì)抗逆基因的高通量篩選具有非常重要的意義。

應(yīng)用領(lǐng)域：

• 耐藥性：藥用生物耐藥機(jī)制研究等（植物、動(dòng)物、微生物）；

• 重金屬：生物重金屬修復(fù)機(jī)制研究等（植物、微生物）；

• 抗逆性：生物抗逆性功能蛋白研究等（植物、動(dòng)物）。

應(yīng)用示例：