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详细说明

酵母單雜交篩選系統(tǒng)(蛋白/DNA互作)

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服務(wù)詳情


技術(shù)原理:

轉(zhuǎn)錄因子通常由一個(gè)DNA特異性結(jié)合功能域(BD)和一個(gè)或多個(gè)其他調(diào)控蛋白相互作用的激活功能域(AD)組成,用于酵母單雜交系統(tǒng)是一種典型的轉(zhuǎn)錄因子酵母GAL4蛋白,GAL4的BD靠近羧基,可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位點(diǎn)(UAS),而AD可與RNA聚合酶或轉(zhuǎn)錄因子TF相互作用,提高RNA聚合酶的活性。BD和AD可完全獨(dú)立地發(fā)揮作用,因此可將GAL4的BD置換為文庫(kù)蛋白編碼基因,只要其表達(dá)的蛋白能與目的基因相互作用,同樣可通過AD激活RNA聚合酶,啟動(dòng)下游報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄。 

圖片1.png


專業(yè)服務(wù)優(yōu)勢(shì):

一、文庫(kù)選擇優(yōu)勢(shì):

   1.定制一庫(kù)四用(單雜、雙雜、三雜、過表達(dá)載體文庫(kù))的特色酵母文庫(kù):使用優(yōu)化后的clonetech的pGADT7-Rec2、GATEWAY二次重組法和“一步法重組”文庫(kù);

   2.提供商品化酵母cDNA文庫(kù)。

二、篩選服務(wù)優(yōu)勢(shì):

酵母核體系單雜交系統(tǒng)可研究DNA與蛋白之間相互作用,篩選步驟優(yōu)化,具有成熟的實(shí)驗(yàn)操作流程,提供真實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及原始圖片。

三、篩選后可同時(shí)進(jìn)行高通量篩選Y1H-seq。

四、篩選的誘餌載體可pHIS2或者pAbai載體兩種篩選方式。


服務(wù)詳情: 

服務(wù)步驟

周期(工作日)

交付材料

價(jià)格

A、誘餌質(zhì)粒的合成及擴(kuò)增

15-20

1、誘餌質(zhì)粒
2、整合后Y1H的菌
3、測(cè)序結(jié)果
4、檢測(cè)圖片
5、初篩圖片
6、復(fù)篩圖片
7、測(cè)序及分析結(jié)果+陽(yáng)性克隆菌液
8、驗(yàn)證圖片+驗(yàn)證的AD質(zhì)粒
9、驗(yàn)證圖片
10、項(xiàng)目報(bào)告

詢價(jià)

B、線性化誘餌質(zhì)粒

10-15

C、整合線性化誘餌質(zhì)粒至Y1H

D、鑒定測(cè)序及比對(duì)分析

E、自激活檢測(cè)

F、初篩

15-20

G、復(fù)篩

H、陽(yáng)性克隆測(cè)序

I、一對(duì)一驗(yàn)證

15-20

J、點(diǎn)板驗(yàn)證

K、項(xiàng)目結(jié)束



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